产品货号:
LA10981
中文名称:
饱和油红O染色液
英文名称:
Oil Red O solution
产品规格:
20mL|100mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品可以通过显示细胞内的脂滴来反应组织器官的脂肪变性和类脂的异常沉着;也可以鉴别脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。本产品既可以用于组织染色又可以用于分析细胞样品中脂质状况。根据脂质的浓度不同,脂质阳性染色结果可呈橘黄至红色。本产品选用优质的进口原料,染色清晰而稳定,操作便捷。100mL饱和油红O染色液可以配置成大约166mL的工作液,500mL饱和油红O染色液可以配置成大约833mL的工作液。
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,不溶于水而溶于有机溶剂。人体的脂质主要有两种:一是储存脂质,如中性脂肪(即甘油三酯),主要分布于皮下、肾、胰腺等部位;二是结构脂质,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。脂滴是细胞内中性脂肪的主要贮存场所,在正常情况下,除脂肪细胞之外,其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴,如果细胞质内出现大量脂滴即指示为脂肪变性,常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。
油红O是一种脂溶性偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,能特异性地使组织和细胞内的中性甘油三脂、类脂、脂蛋白等染色,效果要优于传统的苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B等。当用油红O染色时,油红O在组织细胞内脂质的溶解度比在原溶剂中的溶解度更大,所以油红O就从有机溶剂转移入脂质而使之染色。
组分 | 20mL | 100mL | 500mL |
饱和油红O染色液 | 20mL | 100mL | 500mL |
说明书 | 1份 |
保存:2~8℃避光,有效期一年。
- 油红O染色工作液不够稳定,易产生沉淀,不宜提前配制。工作液可以重复利用,但如果当天没有用完需舍弃。
- 有机溶剂会溶解样品中的脂质,因此固定样品时不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%中性福尔马林或10%福尔马林),也不采用石蜡切片,需用冰冻切片或碳蜡切片。
- 如果做脂肪组织冰冻切片,冰冻温度比普通要低,切片厚度不可太薄,过薄的切片常会使脂质丢失,一般厚度为6~10μm。
- 完全成熟饱满的脂肪细胞容易破裂,脂滴泄漏,所以压片、切片时应注意。
- 甘油明胶封片的样本,保存时间不长。如需长期保存,可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。
- 油红O染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。染色时染色液应充分覆盖组织细胞。
- 60%异丙醇分化,可在镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。建议使用苏木素复染,增加染色对比度。
- 第一次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
- 本试剂为油红O的饱和溶液,因此有少量沉淀为正常现象。使用时,应在配制成工作液后自行过滤。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
一、工作液的配制
按照饱和油红O染色液:蒸馏水= 3:2的比例配成油红O工作液,混匀,室温放置5~10min,过滤后使用。
注:油红O染色工作液不稳定,不宜提前配制。
二、染色程序
- 冰冻切片:
- 制作好的冰冻切片不固定或用10%中性福尔马林固定10min,蒸馏水充分洗涤。
- 60%异丙醇浸洗20-30s。
- 油红O染色工作液染色10~15min。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - 60%异丙醇分化至间质清晰,蒸馏水中稍微清洗。
- Mayer苏木素染色液复染核1~5min。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - (可选)1%盐酸溶液稍微分化一下。
- (可选)自来水漂洗10min或稀碳酸锂溶液中促蓝。
- 蒸馏水中稍微清洗。
- 用滤纸吸干周围水分,甘油明胶封片并在显微镜下观察。
- 制作好的冰冻切片不固定或用10%中性福尔马林固定10min,蒸馏水充分洗涤。
- 培养细胞:
- 移除细胞培养基,PBS洗两次,加10%中性福尔马林固定液固定20~30min。
- 弃去固定液,用蒸馏水洗2次。
- 60%异丙醇浸洗5min。
- 弃去60%异丙醇后加入油红O染色工作液,覆盖住底板即可,浸染10~20min。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - 弃去染色液,蒸馏水洗2~5次,直到无多余染液。
- Mayer苏木素染色液复染核1~2min。弃去染液后水洗2~5次。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - 1%盐酸溶液分化1min,弃去。
- 加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。
- 移除细胞培养基,PBS洗两次,加10%中性福尔马林固定液固定20~30min。
- 细胞涂片
- 制备新鲜骨髓、血液涂片,置于10%中性福尔马林固定10~15min。
- 取出涂片,放于流通的空气中10~15min。
- 放入油红O染色工作液浸染15min。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - 60%异丙醇分化20-30s,流水冲洗,蒸馏水稍微清洗。
- Mayer苏木素染色液复染核1~2min。
注:可根据染色结果和要求调整时间。 - 1%盐酸溶液分化1min,蒸馏水稍微清洗。
- 用滤纸吸干周围水分,甘油明胶封片并在显微镜下观察。
- 制备新鲜骨髓、血液涂片,置于10%中性福尔马林固定10~15min。
三、染色结果
中性脂肪 | 橘黄色至红色 |
磷脂 | 粉红色 |
细胞核 | 蓝色 |
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